对PCR产物进行标记跟踪,实时监测反应过程,从而实现对目标基因表达量的定量分析。以下是关于荧光定量PCR仪的详细介绍: 工作原理 荧光定量PCR仪基于聚合酶链式反应(PCR)原理,利用荧光信号来监测DNA片段数量变化。在PCR反应体系中加入荧光基团,通过设计 ...
这些实时或定量PCR(qPCR)技术检测的是每一循环中处于指数增长期的PCR产物。在此我们介绍一种新的实时定量PCR技术,该技术灵敏、特异,并且只需要两种引物即可进行。 Plexor™ 化合物是一种用于实时PCR的有力技术 引物设计 Plexor™技术利用两种经过修饰的 ...
各个组份都能影响PCR结果的好坏。 1. 反应缓冲液:一般随Taq DNA聚合酶供应。标准缓冲液含:50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH8.3室温),1.5mM MgCl2。Mg2+的浓度对反应的特异性及产量有着显著影响。浓度过高,使反应特异性降低;浓度过低,使产物减少。在各种单核苷酸 ...
在Tm允许的范围内,选择较高的退火温度可大大减少引物与模板之间的非特异结合。 6. 减低污染的常规措施:①将PCR试剂、PCR产物及其他分子生物学试剂分开放置;②应保持样品制备、PCR反应液配制与PCR产物分析三个工作区的独立性;③使用阳性和阴性对照 ...
Wizard ® SV Gel and PCR Clean-Up System 50反应 A9281 1 Wizard ® SV凝胶及PCR纯化系统用于从标准或低熔点琼脂糖凝胶纯化长度100bp-10kb 的DNA片段或直接从PCR反应液中纯化PCR产物。凝胶缓冲系统采用TBE或TAE。回收效率因DNA片段的大小而异,可高达95%。PCR产物纯化可有效去除 ...
PCR中引物的黏合温度(annealing temperature)决定了黏合的特异性,温度越高特异性越强,但过高则不能实现引物和模板的结合,而过低会产生大量非特异性产物。因此进行PCR时需要寻找合适的黏合温度。 递减PCR开始先设定一个比较高的黏合温度,每个循环黏合温度 ...
实时荧光定量PCR技术(Arisaema cum bile PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入可与DNA产物特异性结合的荧光基团(包括荧光染料或荧光标记的特异性探针),对PCR产物进行标记跟踪,随着PCR反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环 ...